单纯地化验乙肝五项定性检查，要看是否有乙肝，看加号还是减号，通常不需要空腹。但如果想检查乙肝五项定量，则需要空腹检查。
乙肝五项定量的检测方法有四种，分为荧光免疫法、酶联免疫法、放射免疫法和化学发光法。
这四种方法检查乙肝五项各有利弊，但目前医院检查的乙肝五项大多是荧光免疫法，此种方法可以具体测出乙肝表面抗原的定量，以及乙肝表面抗体的定量数值，便于对疾病的进一步判断。
比如乙肝表面抗原定量较高，则可以进一步检查乙肝病毒DNA以及肝功，考虑抗病毒治疗。如果乙肝表面抗体的滴度很高，大于100mU/ml，则说明保护性抗体足够，5年-10年都可以不用再次注射乙肝疫苗。
如果表面抗体的滴度在10mU/ml左右，则需要5年左右复查乙肝五项定量。如果表面抗体的滴度在1-10mU/ml之间，可以进行乙肝疫苗的加强针。如果小于1mU/ml则需要进行乙肝疫苗三针完全接种。
