如果测定血皮质醇，要求抽血时间应该在早上八点左右，要空腹，因为食物当中可能会含有某些激素成分，从而影响结果的可靠性。皮质醇可能会受很多应激因素影响，最好能保证头天晚上的睡眠。另外，药物也可能影响皮质醇测定结果，比如休息不好，吃镇静、安眠药物，可能会影响结果的测定。身体状况也非常重要，如果身体处于特殊的疾病状态，比如外伤、手术以后或者有些轻微的感染，最好在身体恢复健康以后再进行皮质醇测定。
皮质醇测定还需要了解节律，也就是身体里面皮质醇激素在早上八点最高，下午五点和晚上，特别是零点就降到最低。如果病情需要，甚至需要住院，在医生的指导下由护士帮忙按节律进行血液的化验，测定皮质醇节律。如果测定的是24小时尿游离皮质醇，需要留好尿液，比如从早上七点开始先排空膀胱，把24小时尿液要流到一个容器里面，最后到了第二天早上七点再排空一次膀胱，最后一次的尿一定要留住。留尿期间为了减少留尿不准，24小时最好不要出远门。有些人怕麻烦，过度减少喝水或者过量喝水，都有可能影响尿液测定结果。第二天把所有的尿要整理好带到医院，测定24小时尿量、24小时尿浓度，最后得出可靠的尿游离皮质醇的测定。血皮质醇测定和尿皮质醇测定都有利于诊断皮质醇增多，或者肾上腺皮质功能减退，尿游离皮质醇的测定，特别是在皮质醇增多症时，更有利于评估病情的严重程度。
