25-羟基维生素D可检查人体是否缺乏维生素D，是否缺乏维生素D主要金标准是检测血液25-羟基维生素D浓度。如果低于30ng/dl，常定义为维生素D不足。如果低于20ng/dl，常定义为维生素D缺乏。如果低于10ng/dl，多定义为维生素D严重缺乏。
实际人体合成维生素D主要靠皮肤合成，由于现代人在户外活动时间比较短，也很少做户外体力活动，故很多人都会缺乏维生素D。维生素D缺乏可以导致骨代谢问题，如在成年人可以导致骨质疏松，严重维生素D缺乏可以导致骨软化。对于幼儿或成长期儿童，可能会导致佝偻病。所以，对于有危险因素或有症状人群，在临床中会检测血25-羟基维生素D评估是否缺乏维生素D。
