心肌酶检查通常需要空腹，在空腹不进食时抽血所检测到的心肌酶标准较正确。除非部分急危重症的情况，如心脏急症怀疑急性心肌梗死、急性重症心肌炎或暴发性心肌炎较危急时，需要急采心肌酶，此时不需要饮食控制。若是择期检查，需要进一步体检或想进一步了解心肌酶情况还是需空腹。
进食后整体代谢或肌肉代谢都会增加，心肌酶餐后会出现不同程度的升高。因为整体胃肠蠕动使心脏射血增多、心脏做功增加，导致心肌酶出现波动，影响正常检查或参考范围。检查心肌酶前尽量不要剧烈运动，如大量运动会使肌肉做功增多，心肌酶谱里有项肌酸激酶，也与肌肉活动有关。若剧烈活动后再抽血采心肌酶，会出现不同程度的肌酸激酶或者肌酸激酶同工酶成倍升高。
