验孕棒检测不一定要晨尿，中午、下午、晚上都可以。验孕棒检测怀孕不受到时间干扰，只要尿中有HCG，就会表现为阳性。女性如果月经推迟3-5天，最好推迟1周左右时间，这时可以通过验孕棒检测是否怀孕。如果验孕棒阳性，一般说明已经怀孕，验孕棒检测主要机理是检查尿中HCG，即人绒毛膜促性腺激素。
怀孕着床以后孕囊分泌的HCG会进入女性体内，表现在尿液中。验孕棒有HCG相关抗体，通过抗原、抗体的显色反应，会出现两条杠提示阳性，表示怀孕。使用验孕棒检测怀孕出现两条杠时，有时可能是假阳性，多见于卵巢生殖细胞肿瘤，比如卵巢原发绒癌会分泌HCG，表现为验孕棒两条杠但没有怀孕，这种情况称为假阳性，非常罕见。
