在临床上，ABO溶血病的确诊需要通过实验室的检查结果来支持，其中包括血型检查、血清胆红素、血色素或者红细胞压积、溶血三项试验等。对于既往有不良生产史，或者前一胎有新生儿重度黄疸史的孕产妇，都要与丈夫一起做ABO血型和Rh血型检查，如果有血型不合，应当检测孕妇血清中的IgG抗A和抗B抗体。如果抗A或者抗B抗体的滴度＞1:64，提示有发生新生儿ABO溶血的可能。如果有母子血型不合，新生儿出生后需要及时监测胆红素，如果新生儿黄疸出现比较早，并且进行性加重，同时血红蛋白或者红细胞压积快速下降，Coombs试验和抗体释放试验其中一项阳性就可以诊断为ABO溶血病。
