1、眉间皱纹
　　A型肉毒毒素在美容领域最早应用于眉间，这也是应用最多的部位。标准5点注射法适用于大多数患者，每侧2点注射皱眉肌，中间1点注射降眉间肌，每点注射4～5U。中间的降眉间肌点和内侧的皱眉肌点注射位置较深，直接注射到肌肉中。外侧的皱眉肌及眼轮匝肌纤维点注射要浅，皮下注射即可。所有注射点应位于眶缘以上至少1cm，以防止药物播散至上睑提肌造成上睑下垂。测量时应以眶缘为参照点而不是参照眉，对于眉下垂的患者，如果以眉的位置进行参照会对医生产生误导，造成注射部位低于眶缘。对于额肌参与提上睑和提眉功能的患者，皱眉肌外侧点注射过高也可能造成上睑下垂或眉下垂。
　　2、额部皱纹
　　A型肉毒毒素治疗额纹的效果良好。严重的额纹不能仅依靠A型肉毒毒素，还需要结合软组织填充材料注射或手术。
　　额部肉毒毒素治疗的目标是改善额纹，但不引起眉下垂，不影响上面部表情表达。建议应用保守的剂量，以防止出现表情僵硬。当患者努力上提眉时可以评估额肌的力量。静息状态及最大提眉状态下双侧眉位置的微小差别都要标记。标记眉的对称性非常重要，需要治疗前照相并与患者进行交流。
　　在女性患者常采用V形注射方式，但在男性不宜选择这种方式。这种注射方法可能导致眉弓过高，如果在眉尾上方的额部追加注射小剂量肉毒毒素可以避免眉弓过高。如果发生眉弓过高，可以在眉弓的顶点上方1～2cm进行小剂量肉毒毒素注射。
　　通常在治疗额纹的同时治疗眉间皱纹，这样整体效果更佳，而且同时麻痹了降眉肌群，可以降低眉下垂的风险。
　　3、鱼尾纹
　　眼轮匝肌的反复收缩造成外眦外侧呈放射状的鱼尾纹，局部注射肉毒毒素对治疗鱼尾纹有明显的效果。鱼尾纹治疗常用3点注射，每点注射3～5U，在眶外缘呈扇形注射。中间注射点与外眦处于同一水平，注射点间距8～10mm，但具体需结合皱纹分布情况。
　　在瞳孔中线睑板下方2mm处下眼睑追加注射1U肉毒毒素，会使肌肉平滑，使眼睛显得更大。但过度治疗可能导致眼睑外翻。