肿瘤的二级预防是肿瘤预防中的第二步，主要是临床前预防，即早期发现、早期诊断和早期治疗，如单位或每年自行做体格检查，并对高危人群进行筛查，是一种主动筛查。
如患有萎缩性胃炎的患者，需检查胃癌可能性，其属于胃癌高危人群。有乳腺癌家族史的人群，需定期检查有无乳腺癌的可能性。有家族性结肠息肉的人群，应定期复查肠镜，明确有无肠癌发生的可能性。经常吸烟的人群，需进一步检查肺CT等，明确有无肺癌发生的可能。
另外，肝癌也有高危因素，如年龄＞40岁，有肝癌家族史，有肝炎、肝硬化背景，或长期大量饮酒、有脂肪肝等。对有高危因素的特定人群进行筛查，可通过较小的代价，早期发现、早期诊断较早的肿瘤，才能进行早期治疗，且早期治疗的效果相对较好。
