通常不在下午检查激素六项，要求患者早晨空腹到门诊抽血检查激素六项，检查时间在8-9点比较合适。由于体内激素分泌并非时持续过程，激素分泌通常为脉冲式，下丘脑的促性腺激素释放激素通常呈脉冲式分泌，大概1-2小时分泌1次。激素水平并非恒定数值，而是波动的曲线，通常恒定在早晨、空腹检查激素水平，如此检查结果较为准确。
患者通常在月经第2天检查激素六项，此时检查为激素基础数值，除睾酮、泌乳素外，雌激素、孕激素、卵泡刺激素、黄体生成素等激素在整个月经周期中呈曲线性变化，因此不同时间检查的正常值不同。通常要求在月经第2天检查激素六项，且为早晨、空腹时检查。
