利福平和异烟肼是必须分开服用的，两药合用会增加肝毒性的发生危险，尤其是原有肝功能损伤者和异烟肼快乙酰化患者。为避免结核菌对药物产生耐药性，提高抗菌效果。对结核病的治疗，一般是用2-3种抗结核药物联合使用。
异烟肼和利福平是需要经常联合抗结核的药物，但两个药不能一起吃，可以采取早晨利福平空腹顿服，晚上异烟肼顿服的方法，既减少了两者在体内相互作用的机会，又增加它们相互协同的作用，减少了对肝脏的毒性。在服药期间需要定期检查血象，做肝功能检查。一旦出现异常，应立即进行相关处理。