碳-14呼气试验受检者需要空腹或进食后2小时以上再进行呼气试验，在试验前需要用温水送服一颗含有碳-14无放射性同位素的胶囊药剂，保持相当平静状态等待20分钟，其目的是为了让胃部中的尿素酶与碳-14进行充分混合反应。
然后受检者向呼气仪器的集气瓶进行持续呼气，呼气时长要连续保持3分钟以上，期间不能进行间断，直到集气卡上的指示剂从橙色转变为黄色就可以停止呼气。
气体收集完毕后，对气体进行封袋保存，然后送至检验科对样本进行检测，如果患者出现有幽门螺杆菌感染的情况，检测结果会显示阳性的情况。碳-14呼气试验相对于传统胃镜检查方式，具有无创伤、操作便捷、诊断率高等优势。