腰穿也称为腰椎穿刺术，是临床医生必须具备的基本操作技能。腰穿步骤大致为先使患者保持合理的体位，通常取侧卧位，尽量使躯干背部与检查台面垂直，头部尽量向胸前俯屈，下肢尽量向胸腹部屈曲，对局部进行消毒铺巾，再选择合适的穿刺点，通常选取腰3-4或者腰4-5椎间隙进行穿刺。
对穿刺点进行局部麻醉之后，最后在穿刺点开始进针，进针时如果感觉有落空感，多提示穿刺已经成功，此刻可以将穿刺针针芯取出。如果有脑脊液滴出，就证明穿刺成功。