胰岛素注射是皮下注射，不可以注射到肌肉层，人体适合注射胰岛素的部位都需要皮下脂肪丰富、容易操作、血管神经分布少，推荐部位有腹部、大腿外侧、上臂外侧和臀部外上侧。胰岛素注射部位吸收胰岛素的速度快慢不一，由快到慢的顺序是腹部、上臂、大腿、臀部。严格来说，注射胰岛素的部位应该根据注射胰岛素的类型不同，选择相应的部位。速效胰岛素类似物可以在任何注射部位注射，短效胰岛素首选腹部，中效胰岛素首选注射部位是大腿和臀部注射。长效胰岛素首选注射部位在大腿和臀部，其他的部位也可以。预混胰岛素如果打两次，早餐前注射的首选部位是腹部，晚餐前注射，首选注射部位臀部和大腿皮下。
长期胰岛素注射的患者要进行有规律、有计划的注射部位轮转，以防止同一部位持续注射引起皮下脂肪增生，甚至产生硬结，从而导致药物吸收不好，出现血糖波动。将腹部分为四个象限，大腿和臀部各等分为两个象限，每周使用一个象限，并始终按顺时针方向进行轮转，腹部注射应该避开脐周半径2.5cm圆形区域。但需要注意，越靠近腰部两侧，皮下脂肪厚度越薄，肌肉注射的风险越高。等分区域内任何两个注射点之间应该至少间隔1cm，且避免在一个月内重复使用同个注射点，严格遵守每天同一时间注射同一部位的原则。