排卵试纸的原理，是通过检测黄体生成激素的峰值水平来预测是否会排卵。女性排卵前的24-48小时，尿液中的黄体生成激素会出现高峰值，用排卵试纸检查会出现阳性的结果，意味着将在24-48小时内排卵，这时候同房受孕几率会比较高。
对于月经周期规律28天的女性，可以从月经的第11天左右开始，每日固定的时间留取尿液进行检查。留尿前的两小时，避免大量饮水，以免造成尿液稀释，影响检查结果。如果排卵试纸上出现两条色带或深于对照线的色带，就表示黄体生成素已经出现峰值，意味着将在24-48小时内排卵；如果试纸上出现一条色带，就表示没有排卵；如果一条色带都没有，就表示试验出现问题，可能是检测方法不对或试剂失效，应用新的试剂条重新测试。所以，用有效的排卵试剂检测，至少会出现一条色带，排卵试纸检测出现阳性的结果后，意味着将在24-48小时内排卵。