胰岛素注射式皮下注射，不可以注射到肌肉层。人体适合注射胰岛素的部位，都需要皮下脂肪丰富、容易操作，血管、神经分布少，推荐的部位有腹部大腿外侧、上臂外侧、臀部外上侧、腹部，以耻骨联合以上约1cm，肋缘以下约1cm，作为腹部的边界。脐周2.5cm以外的双侧腹部，同时不能靠近双侧腰部，靠近腰部的位置，皮下组织厚度比较薄，容易注射到肌肉。
大腿在双侧外侧上端三分之一的部位，不能靠近膝盖。因为大腿上端外侧皮下组织比较厚，而且远离大的血管和坐骨神经。双侧臀部上端外侧，该部位的皮肤皮下组织丰富，肌肉注射风险比较低。上臂侧面和后侧部位的中三分之一，同样该部位皮下组织比较厚。胰岛素注射部位吸收胰岛素的快慢不一，由快到慢的顺序是腹部上臂大腿和臀部。
如果使用速效胰岛素类似物，可以注射在任何部位。如果使用短效胰岛素，首选是腹部，因为吸收速度比较快。如果使用的是中效胰岛素首选的部位在大腿和臀部注射。如果使用的是长效胰岛素，首选大腿和臀部。如果应用的是预混胰岛素，首选注射部位至臀部和大腿皮下。如果用胰岛素注射，注射的部位要定期轮换，避免长期一个部位注射，造成皮下组织增生影响胰岛素的吸收。