C肽是由胰岛β细胞分泌的肽类激素，和胰岛素等分子分泌。所以可以通过C肽释放试验来代替胰岛素，判断胰岛β细胞的功能。测定C肽释放试验的步骤如下：
1、空腹抽取静脉血，测定静脉血糖、空腹C肽，可同步测定空腹胰岛素。
2、空腹抽取静脉血后，在5分钟之内口服75克葡萄糖或者进食100克面粉做的馒头。从进食第1口饭开始计时，进食后1小时、2小时分别抽取静脉血，测定血糖、C肽和胰岛素。
正常人的C肽高峰出现在进餐后1小时左右，高峰值是空腹的4-5倍，进餐后2小时有所下降。1型糖尿病患者表现为空腹、餐后1小时、餐后2小时C肽都很低的低平曲线。2型糖尿病患者，则表现为C肽分泌高峰出现在餐后2个小时，出现高峰延迟和减低。