ACTH刺激试验又称为处肾上腺皮质激素刺激试验，其临床的适应范围是用于肾上腺皮质功能减退者。试验的方法是在试验前留24小时尿，测定尿的17-羟皮质类固醇、17酮皮质类固醇，或者在试验开始前测定血浆的皮质醇，在试验的当日使用促肾上腺皮质激素25个单位，溶于5%的葡萄糖液500mL中，连续静滴八小时，收集试验日的24小时尿液，再次测定17-羟皮质类固醇、17-酮皮质类固醇。
试验采血两天的方法，通过测定的数值，正常情况下注射ACTH后血浆的皮质醇可以明显地增高。而对原发性皮质功能减退者，17-羟皮质类固醇没有反应或者上升很少。