C肽正常值是0.8-4.2ng/mL，相当于0.3-1.3nmol/L。C肽由胰岛β细胞分泌，与胰岛素摩尔量一致，且不被肝脏降解，所以测C肽就等于测胰岛素含量。C肽释放试验可用于评价胰岛β细胞分泌功能、储备功能，C肽释放试验在口服葡萄糖后0.5-1小时出现高峰，期峰值为空腹C肽的5-6倍。
C肽水平变化常用于糖尿病的分型诊断，其与血清胰岛素一样，且C肽可真实反映实际胰岛素水平，故也可以指导临床治疗。用外源性胰岛素治疗糖尿病时发生低血糖，通过测C肽可鉴别低血糖发生的原因。C肽不被肝脏降解，主要在肾脏中代谢，所以患肝病时对测C肽值无影响，而患肾病时C肽值会升高。