做糖耐量三次抽血的时间是空腹，服糖以后30分钟、120分钟，在检查之前三天就要做好准备，每天进食碳水化合物不能少于三两，并且有正常的体力活动，试验之前就开始禁食至少八个小时以上，取完空腹血标本以后，将75g的葡萄糖加入300mL水内，五分钟喝完，服糖以后30分钟、120分钟分别取血标本。
如果不适合多次抽血，仅取服糖以后120分钟的标本是必须的。如果正常人服葡萄糖以后血糖迅速升高，30-60分钟达到最高峰，血糖达到峰值以后，浓度迅速下降，在一个半小时到两小时下降到正常水平。
血糖达峰以后，由于继续的刺激胰岛素的分泌，肝糖输出减少，组织对糖的利用增加，同时从肠道吸收的葡萄糖也会逐渐减少，最后完全被吸收，血糖逐渐下降到接近正常水平。血糖开始下降的时候，血糖对胰岛素的刺激也会减弱，胰岛素分泌逐渐的减少，通过糖耐量的检查可以便于诊断糖尿病。