对于叶酸一天什么时间吃最好，没有特别的规定，每天固定时间服用叶酸、避免漏服就好。一般推荐早饭后半个小时服用叶酸，因为空腹服用可能会导致轻微的胃肠道反应。
在备孕期间以及备孕前总共半年的时间，就是备孕前三个月和怀孕前三个月，应该定时服用叶酸片，如果服用叶酸是想起到预防神经管畸形的作用，最少要服用到孕后三个月。如果是对于先天性心脏病的预防或者是孕期贫血的预防，应该是在孕期全程服用叶酸片和复合维生素，叶酸最好是早饭后半个小时服用。
静脉注射叶酸的患者较易致不良反应，故不宜采用，肌内注射叶酸时不宜与维生素B1、维生素B2、维生素C同管注射。如果患者口服大剂量叶酸，可以影响微量元素锌的吸收，所以不宜大剂量服用。